随着动物细胞培养技术在组织学与胚胎学、细胞生物学、肿瘤学、免疫学、营养学、药理学、毒理学等学科的广泛应用,促使细胞培养技术的普及已成为一种可能。目前,有许多基层科研机构正在建立动物细胞培养实验室,现就细胞培养室的硬件建设谈点看法,供参考。
1 总体原则
1.1 净、污分流 细胞培养室与相关辅助用房必须分开。培养室内环境要求清洁、空气清新、无尘、干燥。
1.2 布局合理,方便操作 所有实验室的布局要求统一、协调,最好相邻,以利于工作;室内各项设备安排要紧凑,节省空间,方便工作,避免交叉干扰。
2 细胞培养实验室
2.1 准备室 主要用于培养器皿的洗涤、消毒、培养物的准备和物资保存等。为避免相互间不必要的生物或化学污染,可以数间小室组成为佳;准备室应具备良好的通风和采光,但应避免灰尘污染。
2.1.1 洗涤区 设有水槽、洗涤池,地面应设置地漏,以利水渍快速干燥。
2.1.2 消毒区 供物品和器械消毒及烘干用,常用消毒方法有干热法和湿热法。因设备耗电量大、产热量高,应单独配备供电线路。
2.1.3 制水区 用于制备符合实验要求的清洁水,以供洗涤培养器具和配制培养液用。要求供、排水方便。
2.1.4 控温设备区 主要放置冰箱、低温冷藏箱、培养箱等设备,以保存实验室内需低温保存的物品,如细胞株、某些试剂、酶、培养基、配制好的溶液及供实验室内常规培养和孵化胚胎等需要。
2.1.5 精密仪器区 主要放置电子天平、酶标仪、分光光度计等设备。要求工作台有较好的水平度、有较高的抗震能力、环境温湿度变化小、无尘等。
2.2 培养室
2.2.1 缓冲间 常设于培养室外,要求清洁、干燥和不通风,并设置紫外灯等必要的环境消毒设备。
2.2.2 培养室 常称无菌室,是专门用于进行细胞培养和各种无菌操作的实验室,要求清洁、干燥、无菌、不通风。室内除放置CO2培养箱、超净台、倒置镜、水浴摇床、离心机和冰箱等设备外,还应有放置无菌器具的橱柜和一定的操作空间。
2.3 其他实验室 根据研究方向可配套建立诸如细胞遗传学实验室、细胞生物学实验室、分子生物学实验室、电生理实验室、生化实验室、形态学工作室等。
3 配备仪器设备
3.1 超净工作台 是目前普遍应用的无菌操作装置。按气流方向的不同可分为水平流和垂直流二种,以垂直流超净台较为常用,气流从上向下流动,形成气流屏障,能较好地保持台面无菌和操作条件。
3.2 控温设备 主要指CO2培养箱、三气(O2、N2、CO2)培养箱、隔水式电热恒温培养。