PCR实验室建设要点及院感管理
更新时间：2022-04-13 17:35:20浏览次数：0
根据联防联控机制综发[2020]181号文件要求：“各地要加强三级医院、传染病专科医院、县（区）级及以上疾控机构、海关及有条件的县医院实验室建设，使其具备开展新冠病毒检测能力”。各医院都在进行PCR实验室的建设工作，其中发现存在一些问题。PCR实验室应相对独立，尽量避免与其他普通实验套叠或者有通道上的交叉。我们看过一个图，他们的PCR实验室设置在检验科的最里面，医废和标本的运送要穿过检验科的整个走廊，这种情况人流、物流、污物均在同一个通道，交叉感染风险较高，应尽量避免。PCR实验室应设置以下区域：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。这个4个区域在物理空间上必须完全独立，各区域无论是空间上还是在使用中，应当始终处于完全的分割状态，不能有空气的直接相通。根据使用仪器的功能，区域可以适当合并。每个区域间设置传递窗，要求一侧打开时另一侧无法打开。4个区域应设置独立的缓冲间，应设置可以通到四个操作区域的PCR走廊，在进入各区域前，应设置更衣间，每个区域的衣服可用不同颜色进行区分，在清洁区应设置洗澡间、卫生间、值班室。还应考虑到医废和标本的运送通道。PCR实验室并没有严格的净化要求，但是为了避免各个实验区域间交叉感染的可能性，通风方式应为机械通风，不应自然通风，且不宜使用循环风。同时要严格控制送、排风比例以保证各试验区的压力要求。PCR实验室的空气流向应按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区进行，防止扩增的产物顺空气气流进入扩增前的区域。可选择负压排风装置，核心区域相对于相邻区域最小压不小于-10Pa。也可通过安装排气扇或者其他方式实现。PCR实验室要求温度18~26℃，相对湿度30%~70%。1.进入各工作区域应当按照单一方向进行，即试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区。3.各区域的衣服用不同颜色标记，离开各区域时不得将工作服带出。4.试验台用移动式紫外线灯消毒，高度60-90cm。扩增区延长照射时间，最好是过夜照射。同时各区域还需安装悬挂式紫外线灯管。5.各试验区尽量避免不必要的走动和进出，减少交叉感染风险。6.扩增产物分析区可能会用到某些可致基因突变和有毒物质，应特别注意实验人员的安全防护。7.试剂储存和准备区：本区域对压力没有明确要求，储存试剂和用于标本制作的消耗品等材料应当直接运送至该区，不得经过其他区域；试剂盒中的阳性对照品及质控品不应当保存在该区，应保存在标本处理区。8.标本制备区：相对于临近区域应为正压，以避免临近区域进入本区的气溶胶污染。9.扩增区：相对于临近区应为负压，为避免气溶胶所致的污染，应当尽量减少在本区域内的走动。必须注意的是，所有经过检测的反应管不得在此区域打开。10.扩增产物分析区：相对于临近区域应为负压。本区域是最主要的扩增产物来源，因此必须注意避免通过本区域扥物品带出。废液必须收集至1mol/L的HCl中，并且不能在实验室内倾倒，而应在远离实验室的地方倒掉。用过的吸头也必须放至1mol/L的HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序处理，如焚烧等。本区域需要配置高压灭菌锅用以灭活扩增后的标本。一些医院的设计稿基本都是这个样子。这个布局在院感上明显的不符合“三区两通道”的要求：只有污染区（四个操作间）、潜在污染区（PCR走廊）、没有清洁区（洗澡间、值班室），没有医废通道和标本运送通道，没有更衣间来穿戴防护用品，穿脱防护用品、可复用防护用品的浸泡、清洁用具存放均在狭小的缓冲间进行。各医院的PCR实验室的建设主要还是参考《医疗机构基因扩增检验实验室工作导则》（2010版），该导则重点强调了实验操作区域的设置，未考虑到感控的部分流程。因此，建议各医院设计PCR实验室时还是需要感控专职人员提前介入，以免建好之后再改建，延长工期、浪费财力。最后还是要强调一下PCR实验室的终末消毒，这涉及到医务人员的人身安全因此必需关注：
PCR实验室环境分区清洁
清洁区：办公室和会议室等有窗户的区域若无明显污染，应每天定期开窗通风换气数次，湿式清洁桌面、台面和所有物体表面和地面至少1次。储物室、培养室和试剂配制室等无窗户的清洁区若无明显污染，每天早晨湿式清洁桌面、台面和地面至少1次。半污染区：定期进行半污染区环境清洁消毒，每天工作结束后，物体表面、地面和空气各清洁消毒1次。污染区：遇到污染情况随时消毒，每天工作开始前及结束工作后，生物安全柜、实验室台面、地面和空气各消毒1次，废弃标本和实验污物应分类进行消毒灭菌处理；注：有人条件下，不得使用化学消毒剂进行超低容量喷雾和紫外线灯空气消毒。目前PCR实验室开展核酸检测，仅靠人工进行物体表面和环境的消毒耗费了大量的人力和时间，因此空气与物体表面联合消毒，建议可以采用过氧化氢终末消毒系统，实验研究结果显示采用过氧化氢蒸汽对微生物实验室空气进行消毒时，H2O2 剂量为 7. 0 ml /m3和 10. 5 ml /m3 时消毒 30 min 后，符合空气消毒的要求; 对微生物实验室工作台面及墙面进行消毒时，H2O2剂量 7. 0、10. 5 ml /m3 时，消毒 30 min 后符合物体表面消毒的要求。过氧化氢蒸汽对微生物实验室工作台面、墙面等物体表面及空气消毒效果较好，可以作为微生物实验室的综合消毒或终末消毒方法使用。干雾化过氧化氢可有效杀灭实验室内环境表面的微生物，设备自动化程度高和效果一致性好，适用于物体和环境的终末消毒。由于其使用过氧化氢浓度较低、时间较短，可大大降低腐蚀或老化医疗设备的风险。
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